iSTORM 可以实现单分子定位于计数，通过定位与计数可以实现对亚细胞结构以及大分子复合

物结构的解析以及生物动力学的分析。iSTORM 也整合了 SPT 的功能，具体的应用可以参考我们的产品手册

STORM 的原理实质是通过时间换空间的方式实现了对衍射极限的突破，时间分辨率相对不高。通常情况下做活细胞超高不容易，但我们力显智能的 iSTORM 已经实现了活细胞的超高拍摄。

另外，我们的系统还可以实现单颗粒追踪（Single Particle Tracking, SPT）。在分子密度不高的情况下，可以实现单个分子或者纳米尺度颗粒在活细胞内的追踪。可用于分子生物学机制、生物学过程的研究以及药物筛选。

iSTORM 使用的染料需要在缓冲液的配合下具有光切换的性质，例如荧光染料 Alexa 系列中的几种，Atto 系列中的几种；特定的荧光蛋白；量子点；或者其他经过处理、测试后具有光切换性质的染料等；

共聚焦实验中使用的染料需要具有稳定发光、不易光漂白、亮度高的性质；

因而适用于 STORM 和共聚焦的染料各有不同；

力显在此领域有丰富的技术经验，使用力显的整体解决方案，可以快速、高成功率的获得实验

结果。

跟共聚焦比简单来说：两点我们不能做 1.不能层扫 2.不能活细胞长时间连续拍摄，其它共聚

焦能做的我们都能做。

iSTORM 可以提供比共聚焦高 10 倍的空间分辨率，可以提供样品内单分子的定位、计数、轨

迹追踪等信息；

iSTORM 的成像速度比共聚焦慢，但是目前力显的活细胞 STORM 成像可以做到几秒钟完成一

张超高图片的拍摄，同时正在研发的基于深度学习的空间分辨率提升技术可以将成像时间进一步缩短，有望达到共聚焦的水平；

iSTORM 的样品制作需要一些经验，使用的染料需要在缓冲液的配合下具有光切换的性质，并

且需要与硬件拍摄、数据处理进行配合，从而得到超分辨率图像，因而使用上有一些门槛，但是力显在此领域有丰富的技术经验，使用力显的整体解决方案，可以快速、高成功率的获得实验结果。

超高是指突破了衍射极限的光学显微成像系统。由于光存在衍射极限，无论显微镜做的如何精

密，一般在 xy 平面 200nm 以下的结构就看不清了。

我们的超高分辨率显微镜采用的是随机光学重构的原理，利用荧光染料在激光的作用下可以出现亮暗态切换的特性，在某个时间点，一个荧光分子衍射尺度内其他分子都是暗的时候，拍照可以把它记录下来。这些分子的光斑符合高斯分布，通过高斯拟合可以把中心点识别出来。下一个时间点拍照可能是其他分子被记录下来。由于这些染料的闪烁是随机不同步的。重复这一过程成千上万次，就可以把所有的荧光染料记录下来中心点识别出来。利用这些中心点进行重构就得到了突破衍射极限的图像。这就是随机光学重构（STORM）超高的分辨率显微镜的原理。

共聚焦可分为激光扫描共聚焦以及转盘共聚焦，都是只采集聚焦平面的光来提升信噪比。仅靠这种方式不能提升空间分辨率，突破不了衍射极限。有些共聚焦结合了反卷积技术，可以提升一倍左右的分辨率，达到 100 多纳米，有厂家也把这类共聚焦宣传为超分辨共聚焦。这个经典意义的超高分辨率显微成像是有差异的。

技术无法对比，需要根据具体应用场景具体分析，STORM空间分辨率高，SIM时间分辨率高。

具体损伤不好量化，但iSTORM可以进行活细胞成像.

抗体 病毒 核糖体。

扁平细胞更适合，但是不绝对，厚的细胞或者组织切片也可以拍超高。

（1）照明锁定系统的照明部分：使用功率1w，波长455nm的科勒照明系统，明场照明波段与荧光照明波长和成像波段不重合；

（2）照明锁定系统的玻片部分：使用融化在玻片上的塑料小球，保证和样品之间没有相对移动；

（3）照明锁定系统的锁定部分：采用PI压电陶瓷平台，精度1nm，位移范围200um，实现精确校正样本漂移量。

iSTORM超高TIRF系统是将波长为561nm、647nm、750nm的激光光纤接入TIRF模块，通过步进电机驱动器调节激光位置，实现激光照明光路Epi、HILO和Tir三种照明，在Tir处精调驱动器找到最佳成像位置。