所使用相机主要参数:sCMOS四百万像素,2048x2048,pixel6.5um,成像有效面积13.3x13.3mm,帧率30fps,极限帧率100fps(搭配PCIe),量子效率82%@560nm。
水平方向20nm,垂直(z)方向50nm,三通道每个区域像素:738x345,每个通道视野范围:48x22um,垂直(z)方向成像范围1000nm。
力显智能科技的iSTORM超高显微镜可实现3通道同时成像,分别是561、656、750三个通道,每通道激光照明功率不低于150mW,可实现0~100%调节。
力显智能科技的iSTORM超高显微镜系统包含以下模块:显微镜主体、三色成像系统、TIRF系统、激光和控制器系统、成像工作站。
可以的,可以使用商用显微镜的锁焦系统,z方向锁焦精度在20-50nm;使用力显三维锁定系统,z方向锁定精度可以达到5nm。
算法经过优化后,iSTORM超高图像可以实现实时重构,立等可得。
使用物理锁定的方式,实时追踪样品上的一个基准点的位置,并根据此移动样品位置,补偿样品漂移。因为基准点可以在样品制备之前加入,并且在成像过程中亮度保持稳定,所以不会增加样品制备的复杂性,可以在整个成像过程中保持样品位置稳定在1nm左右。
根据样品及结构的不同,成像时间也不同。结构比较复杂的固定细胞可能要几分钟到十几分钟,活细胞成像最快可以几秒钟完成。
使用配置中的缓冲液和染料及照明光配合,可以使样品上标记的荧光染料“闪烁”,使得原始图像上可以获得单分子的荧光染料图像,之后通过单分子定位原理,对每个亮点进行位置拟合,并记录在超高成像结果中。单个荧光点的定位精度与拍摄中获得的荧光点光子数目有关系,一般情况下可以将分辨率提升10倍。
可以先用宽场成像,对样品整体进行快速扫描,找到目标细胞后进行超高成像。
针对固定的细胞我们有专用的双通道和三通道成像缓冲液试剂盒,进行单独售卖。
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